> ","を指定する場合、どのように記述すればよいでしょうか？ 

「,」ではなく、「","」で区切りたいという事でしょうか?
その場合は、

    Items = Line.Split("","")

ではなく、

    Items = Line.Split(""",""")

と書きます。（文字列中に「"」を含める場合は、"" と連記します）

上記のようにすると、たとえば Line が
　　　『"あいうえお","かきくけこ","さしすせそ"』
であった場合、「","」で区切ることで、のように分割されます。